<wbr id="jfwgb"><menuitem id="jfwgb"><legend id="jfwgb"></legend></menuitem></wbr>
    <output id="jfwgb"><optgroup id="jfwgb"></optgroup></output>

  1. 您好,歡迎來到新賽美
    分子生物學系列產品

    總RNA柱式提取試劑盒

    貨號:
    M050
    規格:
    50T
    目錄價:
    ¥499.00
    購買數量
    + -

    RNAExpress Total RNA Kit

     總RNA柱式提取試劑盒

    貨號:Cat.No: M050   Size50 Preps                                       

    *  產品介紹

    RNAExpress Total RNA Kit是新賽美生物研發的新一代快速高效的總RNA提取試劑盒。通過對產品的多重優化,提高了裂解液的效果和增強了提取的靈敏度,最快能在10分鐘之內得到純度更好,質量更高的總RNA。同時對硅基質膜的改進增強了對RNA的吸附能力,每個吸附柱可處理高達50mg組織,或5X106細胞。在優化的試劑中加入了RNA保護劑,防止RNA在操作過程中發生降解,即使在室溫條件下也可以完成。提取的總RNA可用于Northern Blot,Dot Blot,PolyA篩選,體外翻譯,RNase保護分析和分子克隆。

    *  產品特色

    ?  操作快速:最快10分鐘即可獲得高質量的總RNA

    ?  提取純度高:不含基因組DNA污染,不需DnaseI酶處理

    ?  產量高:最大程度地獲得樣品中的RNA

    ?  室溫條件下完成總RNA提取

    *  產品組成

    組成成分

    50   Preps

    RNAExpress   Lysis Buffer1

    50   ml

    漂洗液 RWB2(RNase-Free)

    10ml   (另外添加40ml無水乙醇)

    洗脫液   REB3(RNase-Free)

    3   ml

    離心吸附柱(NcmSpin Column, RNase-Free)含收集管

    50   

    1.RNAExpress Lysis Buffer℃避光保存,其他溶劑及吸附柱室溫保存。

    2.在漂洗液RWB中加入指定量的無水乙醇(分析純),在試劑瓶上標注出,使用完畢后要擰緊試劑瓶,防止乙醇揮發。

    3.洗脫液REB中不含有EDTA,一般情況不影響下游實驗。

    *  操作步驟

    準備試劑(自備):氯仿、無水乙醇等

    1. 各種材料樣本的勻漿處理

    (a)貼壁培養的細胞:吸去培養基,在培養板中直接加入適量的RNAExpress Lysis Buffer(每10cm2生長的培養細胞中加入1ml的RNAExpress Lysis Buffer),水平放置片刻,便于裂解液均勻分布細胞表面裂解,再使用移液器吹打細胞并移至收集管中。

    注意:(1)收集細胞數量不要超過5X106/ml RNAExpress Lysis Buffer;

    (2)RNAExpress Lysis Buffer加入量根據培養板面積確定,若是RNAExpress Lysis Buffer加入量不足,可能導致提取的RNA中有DNA污染。

    (b)懸浮培養細胞:將懸浮培養的細胞和培養基一起倒入離心管中,離心收集細胞,每5X106動植物、酵母或細菌細胞加入RNAExpress Lysis Buffer。

    注意:(1)部分酵母和細菌細胞可能需要勻漿儀或液氮研磨處理;或者需要使用溶菌酶進行裂解處理。

    (2)加入RNAExpress Lysis Buffer前不要洗滌細胞,以免RNA降解。

    (c)動物、植物組織:取新鮮或-70℃冷凍的動植物組織在液氮中充分剪碎研磨,將研磨成粉狀的樣品轉移至離心管中,每20-50mg組織加入1ml RNAExpress Lysis Buffer,勻漿儀進行勻漿處理。

    注意:(1)要在液氮等低溫下處理樣品組織,避免RNA降解;

    (2)樣品體積一般不要超過RNAExpress Lysis Buffer體積的10%。

     

    2.  樣品在加入RNAExpress Lysis Buffer后用移液器反復吹打幾次,直至裂解液中無明顯沉淀,使樣品充分裂解。室溫靜置5min,使得蛋白質核酸復合物完全分離。

    注意可選步驟4-25,12,000rpm離心5 min,取上清,轉入一個新的RNase-Free的離心管中。(如果樣品中含有較多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物結節部分等,可加此步驟離心去除。離心得到的沉淀中包括細胞外膜、多糖、高分子量DNA,RNA存在于上清溶液)

     

    3.  向上述溶液中加入氯仿,每使用1ml RNAExpress Lysis Buffer加入0.2ml氯仿,劇烈振蕩15sec。

     

    4.  12,000rpm, 4-25℃離心1 min,此時樣品會分為三層:紅色有機相、中間層和上層無色水相。其中RNA主要在水相中,將水相(約500ul)轉移至一個新的RNase-Free的離心管中。

     

    5. 在得到的無色水相的離心管中,加入等體積的無水乙醇,混勻。將得到溶液轉入吸附柱NcmSpin Column中, 4-25℃ 12,000 rpm離心30sec, 若一次不能將全部溶液和混合物加入吸附柱NcmSpin Column,分兩次轉入吸附柱 NcmSpin Column中,4-25℃,12,000rpm離心30sec,棄掉收集管中的廢液。

     

    6.向吸附柱NcmSpin Column中加入500μl漂洗液RWB(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm 離心30sec,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱NcmSpin Column放入收集管中。

     

    7.  重復操作步驟6。

     

    8. 將吸附柱NcmSpin Column放入收集管中,12,000rpm離心2min,盡量除去漂洗液。將吸附柱置于室溫放置2min,徹底晾干

     注意:此步驟目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,如果有漂洗液殘留, 可能會影響后續的RT-PCR等實驗操作。

     

    9. 加入30-50ul的洗脫液REB或者RNase-Free dd2HO,室溫靜置2min,4-25℃,12,000rpm離心1min。樣品保存于-70℃以備長期使用。

     

    *  保存條件

    室溫運輸,RNAExpress Lysis Buffer℃避光保存(單獨包裝),其他溶劑及吸附柱室溫保存,2年有效。

    *  注意事項

    1. 預防RNase污染,如使用無RNase的塑料制品和槍頭,操作時要戴一次性口罩和手套,實驗過程中要勤換手套。

    2. 加入氯仿后,一定要充分振蕩,保證RNA提取的效果

    3. 使用的樣本避免反復凍融,以免影響RNA的產率和質量。

    4. RNAExpress Lysis Buffer含有苯酚,具有毒性和腐蝕性,使用本制品時要穿戴防護物品,避免吸入體內、接觸皮膚、吞食等現象發生。如果不小心發生,應立即用大量的水沖洗并前往醫院治療。


    Copyright ? 2018-2028 蘇州新賽美生物科技有限公司 工信部備案號:蘇ICP備18026714號-1
    技術支持: 蘇州君聯網絡科技有限公司
    在線客服
    在線客服
    二維碼
    91九色在线_国产wwww_www色视频欧美一级 片内射_国产农村妇女毛片精品久久
    <wbr id="jfwgb"><menuitem id="jfwgb"><legend id="jfwgb"></legend></menuitem></wbr>
      <output id="jfwgb"><optgroup id="jfwgb"></optgroup></output>